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① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

產品名稱：兔視網膜色素上皮細胞

英文名稱：Rabbit Retinal Pigment Epithelial Cells

組織來源：視網膜組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

兔視網膜色素上皮分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力強。視網膜色素上皮（RPE）位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間，是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道；主要是由單層色素上皮細胞所構成，排列十分規則。視網膜色素上皮參與醇循環，吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形，細胞分為三部分，即頂部、體部和基底部。視網膜色素上皮細胞無再生能力，細胞死亡后不被替換，而是鄰近的細胞向側面滑動，以死亡細胞遺留下來的空間。視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間，是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與醇循環，吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。

公司實驗室分離的兔視網膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的兔視網膜色素上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

小鼠牙本質涎0蛋白   英文名稱：   Mouse Dein Sialophosphoprotein   規格：      英文縮寫：   DSP

小鼠DNA抗體   英文名稱：   Mouse Deoxyribonucleic Acid Aibody   規格：      英文縮寫：   DNA.Ab

小鼠氧化酶   英文名稱：   Mouse Diamine Oxidase   規格：      英文縮寫：   DAO

小鼠多巴胺受體D1   英文名稱：   Mouse Dopamine receptor D1   規格：      英文縮寫：   DRD1

小鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat calmodulin (CAM) ELISA Kit 大鼠鈣調素(CAM)試劑盒

Humanverylateappearingaigen,VLAELISAKit 人遲現抗原(VLA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

C3試劑盒鮭魚補體蛋白3規格：96T/48T

魚類受精卵細胞凍存試劑盒(低溫)50次

MouseInsulin,INSELISAKit小鼠胰島素(INS)試劑盒規格：96T/48T

HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PACAP-38 腺苷酸環化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸環化酶激活肽-38(抗原)

MANF重組人 MANF / ARMET 蛋白 Protein

CD47 Protein Human 重組人 CD47 蛋白 (Fc 標簽)

ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 標簽)

PACAP-38 腺苷酸環化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸環化酶激活肽-38(抗原)

CD47 Protein Human 重組人 CD47 蛋白 (Fc 標簽)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 標簽)

MANF重組人 MANF / ARMET 蛋白 Protein

兔視網膜色素上皮細胞大鼠降解產物(FDP)試劑盒 ，英文名： FDP ELISA Kit

Pla zeatin riboside (ZR) ELISA Kit 植物玉米素核苷(ZR)試劑盒

Mousemacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 小鼠巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit人晚期糖基化終末產物

細胞HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKitC3a大鼠補體片斷3a

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用