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細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠視乳頭星形膠質(zhì)分離自視神經(jīng)乳頭；視乳頭位于黃斑區(qū)鼻側(cè)附近，境界清楚，呈白色、圓盤狀，因此也稱為視盤。視網(wǎng)膜上視覺(jué)纖維在此匯集，并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭中央有一小凹陷區(qū)，稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視神經(jīng)纖維聚合組成視神經(jīng)的起始端，它沒(méi)有視細(xì)胞，因而沒(méi)有視覺(jué)，在視野中是生理盲點(diǎn)。視乳頭是開(kāi)角型青光眼早受損的部位，星形膠質(zhì)細(xì)胞是視神經(jīng)乳頭處主要的膠質(zhì)細(xì)胞類型，可為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞無(wú)髓鞘的軸突提供結(jié)構(gòu)和生物支持。青光眼視變是位不可逆性致肓眼病。青光眼視變以視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突喪失并伴有視乳頭處細(xì)胞外基質(zhì)重坦為主要特征。導(dǎo)致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞喪失的病理生理機(jī)制尚未闡明，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)調(diào)控神經(jīng)元微環(huán)境起多重作用，越來(lái)越多的證據(jù)表明膠質(zhì)細(xì)胞町能對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、損傷、修復(fù)及再生起極為關(guān)鍵的作用。視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞胞體多扁平，體積較大，形狀多呈不規(guī)則的多邊形，突起較粗，胞核為橢圓形，核仁清晰可見(jiàn)，核周有較密集物質(zhì)，胞質(zhì)稀疏，骨架結(jié)構(gòu)良好，明顯不同于長(zhǎng)梭形的成纖維細(xì)胞形態(tài)。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠視乳頭星形膠質(zhì)采用-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠視乳頭星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： 2,3-DPG ELISA Kit

Mouse parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)檢測(cè)試劑盒

Mouseheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanProinsulin,PIELISAKit人胰島素原

通用型豬胸膜肺感染(Actinobacilluspleuropneumoniae;App)試劑盒20次

ELISAKiteNOS大鼠內(nèi)皮型合成酶

CD34重組人 CD34 蛋白 Protein

0脂酶A1(PLA1)重組蛋白 Recombinant Phospholipase A1 (PLA1)

INSL4重組人 INSL4 / EPIL 蛋白 Protein

DCN Protein Human 重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

0脂酶A1(PLA1)重組蛋白 Recombinant Phospholipase A1 (PLA1)

DCN Protein Human 重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白

CD34重組人 CD34 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

INSL4重組人 INSL4 / EPIL 蛋白 Protein

小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA 試劑盒 96T/48T

Fro of the human aial naiuretic peptide (Pro-ANP) ELISA Kit 人前心肽(Pro-ANP)檢測(cè)試劑盒

HumanUbiquitin,UbELISAKit 人泛素蛋白(Ub)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanadrenomedullin,ADM檢測(cè)試劑盒人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物mRNA直接化試劑盒10次

MouseActivinA,ACV-AELISAKit小鼠活化素A(ACV-A)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。